核酸检测具体步骤

发布网友 发布时间：2022-04-20 06:26

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懂视网 时间：2023-01-07 17:09

1、要分清是发热病人还是普通病人，也就是说如果是有发热或者是有流行病学史、接触史的患者要到指定医院发热门诊指定的取核酸地方，因为这样是为了避免交叉感染。如果是普通群众复工、复产、复学做的核酸检测，应当在另外一处。

2、在核酸检测之前必须要实名登记，也就是说要把真实姓名、地址、身份证信息如实登记。

3、做核酸之前要保持口腔清洁，然后在等待做核酸的期间要佩戴好口罩，自觉保持1m以上的安全距离。在取核酸的时候需要注意最好是能忍住不要咳嗽，以免飞沫喷出。在取核酸的时候医生会要患者张开嘴巴，用一根像棉签一样的试纸去擦拭咽部以及扁桃体，或者是鼻腔周围的分泌物。等采集到分泌物以后就会放置专门的采集收样袋，在低温下保存送检。核酸检测结果的检出时间，因地区采集量以及检测量而不同。

懂视网 时间：2023-03-03 15:19

1、患者头后仰坐位，张开嘴巴发“啊”音，先去除鼻腔和口腔表面分泌的物体。

2、个人专用的压舌板将患者的舌头固定住，然后将采集的工具跨过咽喉及扁桃体直接到取标本的位置。

3、对收集标本处进行反复擦拭后就可以直接提取黏膜细胞。

4、取出采集的咽拭子，这个过程注意不要接触到口腔黏膜、舌头以及口腔分泌的唾液等干扰物，以防止检测结果不准确。

5、将提取到的咽拭子放到特定装置里运到化验室进行检验。然后等待检测结果。

热心网友 时间：2023-03-03 12:27

1、核酸提取使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离方法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按说明书操作。提取RNA时应注意防止RNA降解。DNA应置于-20℃保存，RNA和需长期保存的DNA应置于-80℃保存。

2、逆转录合成cDNA。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。在扩增仪或水浴箱中，在规定的温度和时间下进行逆转录反应。

3、PCR扩增反应PCR反应需使用引物、dNTPs、DNA聚合酶、缓冲液、和适量无RNA/DNA酶超纯水、以及模板。在扩增仪中，按照设定的程序进行扩增。使用二次扩增的套式PCR扩增方法。

4、扩增产物定性分析；扩增产物常用分析方法是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量标准比较，判断扩增片段是否在预期的分子量范围内。其它扩增产物分析方法还有*性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等。

5、结果判定和完成报告单：每一次检测需同时做两个阳性对照、两个阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品结果一致的情况下实验才成立，可以作出核酸阳性或阴性反应结果的判定。

扩展资料：

检测新型冠状病毒特异序列的方法最常见的是荧光定量PCR。因PCR反应模板仅为DNA，因此在进行PCR反应前，应将新型冠状病毒核酸逆转录为DNA。在PCR反应体系中，

包含一对特异性引物以及一个Taqman探针，该探针为一段特异性寡核苷酸序列，两端分别标记了报告荧光基团和淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；

如反应体系存在靶序列，PCR反应时探针与模板结合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性将探针酶切降解，报告基团与淬灭基团分离，发出荧光。

每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子产生。荧光定量PCR仪能够监测出荧光到达预先设定阈值的循环数与病毒核酸浓度有关，病毒核酸浓度越高，Ct值越小。不同生产企业的产品会依据自身产品的性能确定本产品的阳性判断值。

参考资料： 百度百科——核酸检测法